作為生命科學(xué)實(shí)驗(yàn)室的“細(xì)胞觀察利器”，尼康TS2倒置顯微鏡憑借其CFI60無限遠(yuǎn)光學(xué)系統(tǒng)、LED照明模塊及人體工學(xué)設(shè)計(jì)，成為細(xì)胞培養(yǎng)、熒光成像等領(lǐng)域的首選設(shè)備。本文將從基礎(chǔ)操作到高階功能，系統(tǒng)解析TS2顯微鏡的使用方法。
一、設(shè)備結(jié)構(gòu)與核心組件
TS2顯微鏡采用模塊化設(shè)計(jì)，主要包含以下核心組件：
1.光學(xué)系統(tǒng)：CFI60無限遠(yuǎn)校正光學(xué)系統(tǒng)，支持明場(chǎng)、相差、浮雕反差及落射熒光觀察。
2.照明模塊：高亮度白光LED透射照明（Ts2型號(hào)）或LED透射+落射熒光照明（Ts2-FL型號(hào)），波長覆蓋385-625nm。
3.載物臺(tái)：平板載物臺(tái)（170×247mm）或可選機(jī)械載物臺(tái)（126×78mm行程），兼容35mm/100mm培養(yǎng)皿、微孔板及載玻片。
4.控制面板：前面板集成電源開關(guān)、透射/熒光切換按鈕；左側(cè)控制透射光亮度，右側(cè)控制熒光強(qiáng)度。
5.物鏡轉(zhuǎn)盤：五孔物鏡轉(zhuǎn)盤，支持10×、20×、40×等倍率物鏡快速切換。
二、基礎(chǔ)操作流程
1. 開機(jī)準(zhǔn)備
設(shè)備放置：將顯微鏡置于生物安全柜或?qū)嶒?yàn)臺(tái)邊緣，確保載物臺(tái)處于低位（避免物鏡碰撞）。
電源連接：接入100-240V交流電，打開前面板電源開關(guān)，LED指示燈亮起。
物鏡選擇：旋轉(zhuǎn)物鏡轉(zhuǎn)盤至4×物鏡（低倍物鏡），避免高倍物鏡直接接觸載玻片。
2. 光源調(diào)節(jié)
透射光：通過左側(cè)旋鈕調(diào)節(jié)亮度，配合聚光鏡光柵控制光照范圍。
熒光光（Ts2-FL型號(hào)）：選擇熒光波長（如488nm激發(fā)GFP），通過右側(cè)旋鈕調(diào)節(jié)強(qiáng)度，使用遮光板減少環(huán)境光干擾。
3. 載玻片放置
培養(yǎng)皿：使用專用托板（如CS-HP35）固定35mm培養(yǎng)皿，確保細(xì)胞層朝上。
微孔板：將96孔板置于機(jī)械載物臺(tái)，通過X/Y軸旋鈕定位目標(biāo)孔。
載玻片：用壓片夾固定玻片，調(diào)整載物臺(tái)使標(biāo)本對(duì)準(zhǔn)通光孔中心。
4. 調(diào)焦與觀察
低倍鏡（4×/10×）：
側(cè)面注視物鏡，緩慢旋轉(zhuǎn)粗調(diào)旋鈕使載物臺(tái)上升，直至物鏡接近標(biāo)本（間距約2mm）。
左眼觀察目鏡，反向旋轉(zhuǎn)粗調(diào)旋鈕下降載物臺(tái)，直至出現(xiàn)模糊影像，再微調(diào)細(xì)調(diào)旋鈕至清晰。
高倍鏡（20×/40×）：
在低倍鏡下將目標(biāo)移至視野中央，切換至高倍物鏡。
僅使用細(xì)調(diào)旋鈕微調(diào)焦距，避免壓碎標(biāo)本。
5. 相差與浮雕反差觀察
相差觀察：安裝相差物鏡（如10×PH）及預(yù)對(duì)中相差滑塊，調(diào)整聚光鏡高度至75mm（ELWD聚光鏡），獲得高對(duì)比度細(xì)胞輪廓。
浮雕反差觀察：安裝浮雕反差滑塊（聚光鏡側(cè)+目鏡筒側(cè)），通過調(diào)焦照明實(shí)現(xiàn)偽三維成像，適用于厚標(biāo)本（如iPS細(xì)胞球）。
三、高階功能應(yīng)用
1. 熒光成像
濾光塊選擇：根據(jù)熒光標(biāo)記選擇濾光塊（如FITC濾光塊用于GFP觀測(cè)）。
曝光控制：通過右側(cè)旋鈕調(diào)節(jié)LED強(qiáng)度，避免光漂白；使用相機(jī)端口連接CCD相機(jī)，設(shè)置適宜曝光時(shí)間。
多色熒光：Ts2-FL型號(hào)支持同時(shí)安裝3種熒光LED單元，通過濾光塊轉(zhuǎn)盤切換波長，實(shí)現(xiàn)多標(biāo)記共定位分析。
2. 長時(shí)程活細(xì)胞監(jiān)測(cè)
環(huán)境控制：將顯微鏡置于培養(yǎng)箱內(nèi)，維持37℃、5% CO?條件。
自動(dòng)聚焦：搭配尼康NIS-Elements軟件，啟用硬件自動(dòng)聚焦功能，實(shí)現(xiàn)72小時(shí)連續(xù)成像。
數(shù)據(jù)管理：通過相機(jī)端口實(shí)時(shí)傳輸圖像至計(jì)算機(jī)，使用軟件進(jìn)行時(shí)間序列分析。
四、關(guān)機(jī)與維護(hù)
1.關(guān)機(jī)步驟：
降低載物臺(tái)至最低位，切換至4×物鏡。
關(guān)閉光源（推拉亮度調(diào)節(jié)器至暗檔），關(guān)閉電源開關(guān)。
取下標(biāo)本，用擦鏡紙清潔物鏡及目鏡。
2.日常維護(hù)：
定期檢查LED壽命（通常＞20,000小時(shí)），更換老化光源。
使用專用清潔液擦拭機(jī)身，避免酒精腐蝕涂層。
存放時(shí)覆蓋防塵罩，避免物鏡受潮。
五、常見問題解決
圖像模糊：檢查物鏡是否鎖緊，重新調(diào)焦或清潔鏡頭。
熒光信號(hào)弱：確認(rèn)濾光塊匹配熒光波長，增加LED強(qiáng)度或延長曝光時(shí)間。
載物臺(tái)抖動(dòng)：檢查機(jī)械載物臺(tái)鎖緊螺絲是否擰緊，避免外力碰撞。
尼康TS2倒置顯微鏡通過智能化設(shè)計(jì)與模塊化擴(kuò)展，為細(xì)胞研究提供了高效、精準(zhǔn)的解決方案。掌握其操作技巧，可顯著提升實(shí)驗(yàn)效率與數(shù)據(jù)質(zhì)量，助力生命科學(xué)前沿探索。
